產品名稱：HaCaT細胞，人正常皮膚細胞供應商
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產品型號：
更新日期：2021-03-23
訪問次數(shù)：802
HaCaT細胞，人正常皮膚細胞供應商的詳細資料：
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
下列是產品的訂購信息：
產品名稱 | HaCaT細胞，人正常皮膚細胞供應商 |
英文名稱 | HaCaT cells, normal human skin cells |
貨號 | EY-X64041 |
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
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培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
山梔苷甲酯 CAS 64421-28-9 規(guī)格：HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
月桂氮卓 CAS 59227-89-3 規(guī)格：HPLC≥98%;0.1ml 訂購|咨詢
人參 CAS 規(guī)格：1g 訂購|咨詢
酚-3-O-β-D-槐糖苷 CAS 19895-95-5 規(guī)格：10mg 訂購|咨詢
交聯(lián)聚維 CAS 規(guī)格：100mg 訂購|咨詢
遠志酸 CAS 22338-71-2 規(guī)格：HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
苯胺靈;純品型;標準品;有證書 CAS 122-42-9 規(guī)格：0.1g 訂購|咨詢
糞腸球菌 CAS 規(guī)格： 訂購|咨詢
3-O-沒食子酰粘酸 CAS 規(guī)格：10mg 訂購|咨詢
CAS 規(guī)格：50mg 訂購|咨詢
白花前胡丁素 CAS 規(guī)格：20mg 訂購|咨詢
HaCaT細胞，人正常皮膚細胞供應商細胞球蛋白抗原Cygb (cytoglobin) 0.5mg
蛋白酶激活受體-2桔抗肽PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide) 0.5mg
末梢同源匡基因多肽片段DLX4 (Dsital-less homebox4 isoformAlpha/ Beta) 0.5mg
海葵神經毒素（35肽）ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin) 0.1mg
海葵神經毒素（35肽）ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Ala22) 0.1mg
海葵神經毒素（35肽）ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22) 0.1mg
海葵神經毒素（35肽）ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Arg22) 0.1mg
海葵神經毒素（35肽）ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) 0.1mg
海葵神經毒素（35肽）ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln11) 0.1mg
重組乙肝病毒核心抗原rHBcAg 100ug
重組乙肝病毒e抗原rHBeAg(Hepatitis B Virus E Antigen protein) 100ug
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