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細胞培養常用試劑
點擊次數：1533 更新時間：2016-01-08
(一)pH調整液
合成培養液大多呈弱酸性，而細胞生長的zui適pH值為7．0～7．2，因此使用培養液時要調整pH，并注意培養過程中pH的變化，及時換液。常用的pH調整液包括NaHCO3溶液和Hepes緩沖液。
1.NaHCO3溶液NaHCO3是培養基中必須添加的成分，一般情況下按照說明書要求添加，以保證培養基在5％CO2的環境中pH達到設計標準。通常情況下，培養液添加血清后可能偏酸，可臨時用NaHCO3溶液調節其pH值。常用的NaHC3溶液濃度為7．4％、5．6％、3．7％三種。調節pH時，NaHCO3溶液要逐滴加入，并不時搖動培養液，以防止加入過量。若pH過高時，可用高壓滅菌10％醋酸溶液或通人CO2氣體調節。配制時用三蒸水溶解后，過濾除菌，分裝備用。亦可使用高壓蒸氣滅菌，密封，4℃冰箱保存。
2．Hepes緩沖液是一種可以保持細胞培養過程中pH值較長時間穩定的氫離子緩沖劑。一般在克隆化培養時要添加H印es緩沖液。通常使用濃度為10～15mmol／L。配制時，稱取所需的Hepes，用培養液溶解后，用1mmol／L NaOH調節pH到7．O，過濾除菌分裝后備用。
(二)抗生素液
細胞培養中經常使用的抗生素是青，俗稱“雙抗溶液”，可以預防絕大多數的細菌污染。使用的終濃度為100U／ml，為100μg／ml。常用Hanks或PBS配制為100倍濃縮液．分裝凍存，使用前經稀釋后加入到培養液中。
(三)補充液
在細胞代謝過程中起重要作用，合成培養基中都要添加。易降解，應在使用前添加。常配制100倍濃度的濃縮液，濃度為200mmol／L。使用時，每lOOml培養液中加入0．5～2ml濃縮液，終濃度為1～4mmol／L。
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