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腎母細胞瘤蛋白重組兔單抗操作注意事項
點擊次數:156 更新時間:2025-07-17

在操作腎母細胞瘤蛋白重組兔單抗時,需嚴格遵守以下注意事項以確保實驗的準確性和安全性:

1. 抗體保存與解凍

- 長期保存應置于-20℃或-80℃,避免反復凍融導致抗體效價降低。解凍時需在4℃緩慢溶解,或置于冰上短時解凍,嚴禁高溫快速解凍。

- 分裝后的小劑量抗體可減少重復凍融次數,使用前短暫離心以集中液體。

2. 實驗環境控制

- 操作區域需保持清潔,避免交叉污染。建議在超凈臺或生物安全柜中進行稀釋和分裝。

- 若需長期保存工作液,可加入0.02%疊氮鈉(注意毒性),但避免用于活細胞實驗。

3. 樣本處理與抗體稀釋

- 組織或細胞樣本需充分固定或裂解,確保抗原暴露。建議通過預實驗優化抗體稀釋比例(如1:100至1:1000),避免高濃度導致的非特異性結合。

- 使用含1% BSA或5%脫脂奶粉的PBS作為封閉液,減少背景信號。

4. 對照設置與結果驗證

- 必須設立陰性對照(如不加一抗)和陽性對照(已知表達靶蛋白的樣本),以排除假陽性或假陰性結果。

- 若結果異常,需檢查抗體有效期、存儲條件及實驗步驟(如封閉時間、洗滌次數等)。

5. 廢棄物處理

- 實驗后的抗體溶液及接觸材料需按生物危害廢棄物處理,避免直接排放或隨意丟棄。

通過規范操作和細節把控,可顯著提升實驗的重復性與可靠性,為后續研究提供扎實的數據基礎。


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